(天津)為了探討急性髓系白血病(AML-CR)患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNC)衍生的樹(shù)突細(xì)胞(mRNA-DC)體外刺激自體T細(xì)胞抗白血病免疫的可行性及有效性,研究者從AML-CR患者貼壁BMMNC誘導(dǎo)DC,在誘導(dǎo)的第5天用脂質(zhì)體DOTAP介導(dǎo)法以自體白血病細(xì)胞的總RNA沖擊DC,然后繼續(xù)培養(yǎng)24 h促進(jìn)其成熟,培養(yǎng)7 d后收獲細(xì)胞,作為mRNA-DC。以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)DC特征性表型的表達(dá);以MTT法測(cè)定mRNA-DC對(duì)自體T細(xì)胞的促增殖活性;將mRNA-DC與T細(xì)胞按1:3混合,共培養(yǎng)7 d,收獲活化的T細(xì)胞,酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法(ELISPOT)測(cè)定分泌γ干擾素(IFN-γ)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù);乳酸脫氫酶(LDH)釋放法測(cè)定細(xì)胞毒活性。結(jié)果14例AML-CR患者BMMNC均可在體外分化為具有特征性形態(tài)和表型的成熟DC,當(dāng)刺激細(xì)胞與反應(yīng)細(xì)胞比例為1:16時(shí),mRNA-DC可刺激自體T細(xì)胞產(chǎn)生明顯的增殖活性,與未沖擊DC組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ELISPOT分析顯示分泌IFN-γ的mRNA反應(yīng)性的T細(xì)胞得到明顯擴(kuò)增;體外活化的T細(xì)胞在效靶比為20:1時(shí),對(duì)自體白血病細(xì)胞顯示明顯的殺傷活性,與未沖擊的DC組及單純IL-2組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。可見(jiàn)應(yīng)用白血病細(xì)胞RNA沖擊的DC疫苗免疫可以作為一種可行、有效的防治微量殘留白血病的方法。
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