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細胞內鈣通過鈣抑制的腺苷酸環化酶減低刺激腎素釋放 【?2007-02-27 發布?】 臨床報道
細胞內鈣和cAMP是調節腎素釋放的第二信使,cAMP通過腎小球旁(JG)細胞刺激腎素釋放,而增高的細胞內鈣可以抑制該效應。研究人員假定,通過激活腺苷酸環化酶的鈣抑制亞型、增高cAMP和刺激腎素釋放可以減低細胞內鈣,為證實這一設想,研究者從C-57/B6小鼠原代培養JG細胞,當細胞在無血清培養基中生長至密度為70%,存在或不存在100 micromol/L 胞質鈣螯合劑5'5-二甲基-1,2-二-(2-氨基苯氧基)-乙烷-N,N,N',N'-四-乙酸(BAPTA-AM)孵育2小時,以減低細胞內鈣,采用放射免疫測定法確定JG 細胞cAMP含量和腎素釋放。可見細胞內cAMP含量為4.04+/-0.92 pM/mL每毫克蛋白,BAPTA-AM孵育后增加by125+/-33% (P<0.01)。基線腎素為1.28+/-0.40 mg血管緊張素I每升每小時每毫克蛋白,BAPTA-AM可使其增加182+/-62% (P<0.025)。采用抗體進行蛋白印記法識別V 和VI型腺苷酸環化酶,發現約為135 kDa的特異的環帶。當檢驗原代培養分離的JG細胞中的腺苷酸環化酶的鈣抑制亞型,顯示局部較強的胞質染色。針對腎素和腺苷酸環化酶V/VI型細胞染色顯示細胞質內共區域化。腺苷酸環化酶抑制劑(SQ 22,536)完全阻斷BAPTA-AM-刺激的腎素釋放和JG 細胞內cAMP含量。因此,腺苷酸環化酶的鈣抑制亞型存在于JG細胞內。因此,細胞內鈣減低可以刺激腺苷酸環化酶,導致cAMP合成以及腎素釋放。 /**/
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