(哈爾濱)為了探討脂質(zhì)體介導(dǎo)的DCC基因?qū)β殉采掀ば园?卵巢癌)細(xì)胞系SKOV3細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。研究者通過(guò)目的基因克隆、載體構(gòu)建技術(shù),將DCC基因重組于pcDNA3.1(+)質(zhì)粒中,構(gòu)建pcDNA3.1(+)-DCC質(zhì)粒,并通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo),將此質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入SKOV3細(xì)胞中(即SKOV3/DCC細(xì)胞)。實(shí)驗(yàn)分為3組,DCC基因轉(zhuǎn)染組(SKOV3/DCC組)、空載體轉(zhuǎn)染組(SKOV3/Neo組)和空白對(duì)照組(SKOV3組)。RT-PCR技術(shù)和免疫組化染色方法檢測(cè)3組細(xì)胞中DCC mRNA和蛋白的表達(dá),并觀察細(xì)胞集落形成率、生長(zhǎng)速度、細(xì)胞周期等生物學(xué)行為變化。結(jié)果 RT-PCR技術(shù)和免疫組化染色方法檢測(cè)顯示,外源性DCC基因通過(guò)基因重組及脂質(zhì)體介導(dǎo),已整合于SKOV3細(xì)胞并獲穩(wěn)定表達(dá)。SKOV3/DCC組細(xì)胞的生長(zhǎng)速度較SKOV3和SKOV3/Neo組減慢,分別比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。SKOV3/DCC組細(xì)胞克隆數(shù)為(38±8)個(gè),分別與SKOV3和SKOV3/Neo組[分別為(192±8)、(186±10)個(gè)]比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。細(xì)胞周期分析顯示,SKOV3/DCC組,G1期細(xì)胞占78.0%,S期細(xì)胞占5.3%,與SKOV3/Neo組(分別為20.0%、3.2%)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。電鏡觀察顯示,SKOV3/DCC組細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)生長(zhǎng)受到抑制的特征。可見(jiàn) DCC基因可明顯抑制卵巢癌細(xì)胞生長(zhǎng),可能在卵巢癌發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中起重要作用。/**/