（濟南）為了構建抑制大鼠心肌細胞kir2.1基因的真核表達質粒pEGFP6-kir2.1，觀察對大鼠心肌細胞kir2.1信使RNA(mRNA)、蛋白表達情況及搏動頻率的影響。研究者選擇5個針對大鼠心肌細胞kir2.1基因的RNA干擾(RNA mterference)位點，設計合成5對相應的寡核苷酸鏈，形成雙鏈后依次將其連入帶有U6啟動子的載體，得到含5個目的基因的重組質粒pEGFP6-kir2.1。轉染大鼠心肌細胞，并將其分為3組：實驗組、陰性質粒對照組和空白對照組。轉染后72h，用逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白印跡法(Western-blotting)檢測kir2.1mRNA和蛋白表達情況，并觀察細胞搏動頻率。結果轉染后72h，實驗組心肌細胞kir2.1 mRNA和蛋白表達明顯低于兩對照組(P＜0.01)，兩對照組間比較差別無統計學意義；實驗組搏動頻率增加，并顯著高于兩對照組(P＜0.01)，兩對照組之間搏動頻率差別無統計學意義。可見真核表達質粒pEGFP6-kir2.1能明顯抑制大鼠kir2.1基因的表達，提高大鼠心肌細胞的自律性。/**/