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胰腺十二指腸同源框-1基因真核表達載體的構建和轉染 【?2006-03-12 發布?】 臨床報道
(長沙)為了應用陽離子脂質體介導含有大鼠胰腺十二指腸同源框-1(PDX-1)基因的真核表達載體轉染胰腺導管上皮細胞。研究者利用逆轉錄聚合酶鏈反應技術克隆大鼠PDX-1基因,酶切后插入經相同酶切及磷酸化處理的含綠色熒光蛋白(GFP)的空白載體pEGFP-C2,構成重組質粒,再進行HindⅢ、BglⅡ雙酶切篩選、鑒定并測序;陽離子脂質體介導轉染后,熒光顯微鏡下觀察熒光并計算轉染效率從而對轉染條件進行優化。結果限制性酶切分析證實重組后的載體成功載入PDX-1基因;克隆的目的片斷經序列測定與Genebank公布的序列一致;轉染條件優化后重組載體在胰腺導管上皮細胞中有效表達??梢娫趪鴥仁状纬晒寺×舜笫驪DX-1基因,并構建了含有PDX-1基因的真核表達載體;通過優化轉染條件提高了轉染效率, 為將表達PDX-1基因的胰腺導管上皮細胞作為組織工程的種子細胞提供了實驗依據。 /**/
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